蚕豆基因组DNA提取和RAPD反应体系的建立开题报告

 2023-02-12 12:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

大豆是重要的油料和粮食作物,是世界上食用油和植物蛋白的主要来源。中国是大豆的起源中心,品种资源丰富。目前中国国家作物种质资源库已经保存大豆种质资源2万余份,居世界各国大豆品种资源之首。本研究采用issr分子标记技术对多个大豆品种进行遗传多样性分析,对大豆生产育种组合亲本的选择,大豆品种的分类以及对重要大豆种质的利用都有很大的指导意义。

在国内,何予卿等(2001)利用issr分子标记研究737份栽培稻和野生稻的亲缘关系。李进波等(2002)应用issr技术对12个水稻光温敏核不育系进行了dna指纹分析。钱韦等(2000)的研究结果证明,issr标记可以用来对中国疵粒野生稻的遗传多样性进行分析。王心宇等(2001)的研究也证明,利用issr标记技术能将亲缘关系很近的小麦品种或品系区分开来。刘万勃等(2002)采用21个issr引物对37份甜瓜种质进行了遗传多样性研究,结果表明,issr技术可以区分出野生甜瓜和栽培甜瓜,是甜瓜种质多样性研究的一种很好方法。

在国外,issr技术也广泛应用于作物的遗传关系等分析,如joshi等(2000)用issr对水稻进行了遗传多样性和进化关系分析。kantety等(1995)采用issr技术探讨了马齿型和爆裂型玉米自交系的遗传多样性。fang等(1997)认为可以用issr标记区分亲缘关系很近的柑擂品种,prevost等(1999)仅用了4个issr引物就将30多个马铃薯品种区分开来了。总之,issr分子标记技术可以广泛生物的遗传多样性、系统发育、种质资源鉴定、基因标记、遗传图谱分析和生物进化等领域。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标:本研究首先对issr引物进行筛选并对其反应条件进行优化,然后利用筛选出的引物对80个大豆品种进行分析,计算它们之间的遗传相似性值,利用聚类方法分析它们的遗传多样性。

研究内容:

(1)不同大豆品种叶片dna提取与质量检测;

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3. 研究的方法与方案

本研究采用issr分子标记技术对多个大豆品种进行遗传多样性分析。首先种植试验材料,提取样本叶片的dna,检测其dna并筛选合格的dna贮存备用,然后从多对随机引物中筛选出多态性明显、条带清晰、反应稳定的引物并得到其反应程序;对筛选出的引物进行pcr扩增反应,统计数据并利用dps软件对数据进行聚类分析,分析大豆遗传多样性。

可行性分析:

实验材料充分,试验方法和技术成熟,实验所需仪器设备有保障,所以本实验不存在任何风险。

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4. 研究创新点

ISSR分子标记是一种以微卫星序列为引物进行多位点PCR扩增的技术,该技术克服了RFLP、SSR、RAPD、AFLP等标记技术的一些局限性,具有无需预知基因组背景信息、DNA样品用量少、操作简单、重复性好、信息量大等优点,被广泛应用于植物的遗传多样性分析、品种鉴定、遗传作图等研究。本研究是应用ISSR手段对我国南方地区大豆种质材料亲缘关系进行分析,为开展我国南方春大豆育种提供相关理论依据。

5. 研究计划与进展

1.2012年12月查阅相关资料,参考前人的研究成果和经验设计实验方案;

2.2013年6月-10月种植实验材料,记录种植数据,采集实验材料;

3.2013年3月学习dna提取方法,提取参试样品的基因组dna;

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