外源添加物对农杆菌介导不结球白菜遗传转化再生效率的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

课题意义：

不结球白菜是我国南方重要的叶类蔬菜，在蔬菜周年供应上中占据重要的地位。采用基因工程将目的基因导入不结球白菜用以改良遗传特性,是不结球白菜遗传育种的新方向。高效白菜遗传转化体系的建立是白菜基因功能和培育转基因白菜新品种研究的重要组成部分。白菜的遗传转化主要采用农杆菌介导的转化方法。该方法受到组织培养组织再生能力的限制。组织细胞褐变坏死是影响再生效率的重要因素，与活性氧(reactive oxygen species, ros)产生和酚类物质氧化有关。添加抗氧化剂可以减少农杆菌介导转化过程中外植体褐变坏死, 促进外植体生长, 增强农杆菌介导遗传转化再生效率。研究不同种类和浓度外源添加物——抗氧化剂和硝酸银对不结球白菜苏州青再生效率的影响，寻找提高不结球白菜再生效率的抗氧剂浓度及硝酸银浓度对建立高效白菜遗传转化体系具有重要的实践价值和意义。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：得到不同抗氧化剂对农杆菌介导不结球白菜遗传转化再生效率的影响的结果。

研究内容：农杆菌介导不结球白菜苏州青遗传转化过程中，共培养阶段培养基中添加抗氧化剂二硫苏糖醇、抗坏血酸、硝酸银，研究能够有效减少褐化提高不结球白菜再生效率的抗氧化剂，并得到其适宜的浓度。

拟解决的问题：减轻不结球白菜组织培养过程中外植体褐化死亡的现象，提高农杆菌介导不结球白菜遗传转化再生效率。试验出较适合不结球白菜组织培养的抗氧化剂及浓度以及硝酸银浓度。

3. 研究的方法与方案

研究方法：通过农杆菌介导不结球白菜苏州青，以组织培养的方式，诱导再生，通过在共养基和分化培养基中添加不同种类和浓度的抗氧化剂和硝酸银，探究抗氧化剂和硝酸银对农杆菌介导不结球白菜离体再生分化效率的影响。

技术路线：

4. 研究创新点

特色或创新之处

1.为构建稳定的不结球白菜体外再生体系做出进一步探究。

2.探究了不同抗氧化剂在农杆菌介导不结球白菜体外再生效率的影响

5. 研究计划与进展

研究计划：

2018.8月~10月进行预实验

2019.2月~4月：共培养基设置不同抗氧化剂种类和抗氧化剂浓度梯度，开展实验研究抗氧化剂对再生效率的影响。