无选择标记OsGABA-T转基因水稻γ-氨基丁酸及淀粉含量测定开题报告

 2023-02-16 09:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)1.研究目的与意义高血压是一种常见的高危慢性疾病,目前,全球大概有10亿人正承受着高血压病症的困扰,并且这个数字很可能在2025年的时候,增加60%[1]。

对于高血压来说,目前并没有太好的治疗手段,高血压病人一般通过长期服用昂贵的慢性降压药物来缓解症状,这给病人及其家庭特别是发展中国家的高血压人群造成了严重的经济负担,并且治疗效果并不尽如人意。

不少研究报道,gaba(γ-氨基丁酸)具有很好的降低血压的功能,对高血压病人来说是一大福音,它不但可以有效的抑制高血压症状,对治疗高血压疾病更是有着重要的意义[2]。

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2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标和内容首先对生长期中的水稻进行取样调查,筛选出纯合的只含目的片段不含潮霉素基因的植株,其次对于筛选出的纯合稳定植株进行GABA含量的测定,并对其品质指标淀粉含量进行测定,以此得到无选择标记富含GABA且品质较好的转基因水稻植株。

2.拟解决问题 (1)如何筛选得到只含有目的片段而不含标记基因潮霉素的纯合稳定植株; (2)GABA的测定方法; (3)淀粉的测定方法; (4)对转基因水稻品质的评估。

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1.研究方法在传统育种手段中加入基因工程技术,利用转基因的方法来提高稻米中gaba的含量。

一般来讲,要想提高gaba可通过增加其合成和减少其讲解两种途径来提高含量。

阅读文献可知,gaba合成的关键酶为谷氨酸脱羧酶(gad),而其降解的关键酶为gaba转氨酶(gaba-t),故而可提出以下研究方法来提高gaba含量。

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4. 研究创新点

本试验的最终目的是期望得到可以运用于生产的,对高血压病人有帮助的富含gaba 的功能型水稻,由于gaba 在水稻中的含量很少,所以我们利用rna干扰的手段,通过干扰掉gaba 降解的关键酶gaba转氨酶(gaba-t)来提高水稻中gaba的含量,并对成功的转基因植株进行筛选,得到去选择标记的对人体不会产生危害的植株。

水稻作为日常主食被大多数人所需求,且人们对于水稻品质的追求也不断提高。

因此,单纯的得到富gaba的功能型水稻远远不够,还必须使其在农艺性状以及品质方面表现较好。

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5. 研究计划与进展

1.2017年8月-2017年10月将之前师姐选择得到的marker free载体的种子,选取30-40粒进行发苗,pcr测定目的片段的有无从而筛选出纯合只含目的片段不含潮霉素基因的植株,并考察和评价各种农业性状,收种。

2.2017年11月-2017年12月对于选择得到的目标植株,将其按照器官分解,并把各个器官(根、茎、叶、种子、精米)磨粉,进行gaba含量的测定。

3.2018年2月-2018年3月对于上述目标植株进行淀粉含量的测定,对选择的转基因水稻的品质进行评估,并分析整理数据。

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