1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
量子点(quantum dots,qds)是一种半导体纳米晶体,通常由ii-vi族或iii-v族元素组成,主要以cdse或cdte为核心、zns或znse为表面薄层,粒径一般介于1~100nm之间,广泛应用于生物医学、药物筛选和环境检测等研究领域。
最近的研究表明,量子点已经明显影响了雄性小鼠和男性的生殖健康[1,2]。
在一些地区,因为纳米材料的影响,人类精子的质量和数量在最近几年都有所下降。
2. 研究的基本内容和问题
2.1研究目的1) 明确碲化镉对小鼠睾丸组织形态的影响2) 明确碲化镉是对小鼠血睾屏障链接蛋白表达的影响2.2研究内容和拟解决的关键问题1) 本实验主要研究碲化镉(CdTe)对雄性小鼠生殖影响。
2) 拟采用HE染色切片,以明确碲化镉对小鼠睾丸组织形态的影响;以免疫组织化学检测血睾屏障相关蛋白,明确碲化镉是对小鼠血睾屏障何种链接蛋白表达产生影响。
3. 研究的方法与方案
3.1研究方法3.1.1样品处理(1)脱水70%乙醇1h→85%乙醇1h→95%乙醇1h→100%乙醇Ⅰ30min→100%乙醇Ⅱ30min→100%乙醇Ⅲ过夜(2)透明50%乙醇 50%二甲苯混合液 30min→二甲苯Ⅰ1h→二甲苯Ⅱ40min(3) 浸蜡50%二甲苯 50%石蜡混合液1h→石蜡Ⅰ1h→石蜡Ⅱ真空过夜(4)包埋将预先融化好的石蜡注入金属框,待底面石蜡稍微凝固时,用温镊子夹取睾丸组织块放入金属框的中央,待稍凝,放入预备好的标签纸,然后将金属框快速全部浸入冰水中,待石蜡全部变硬后即取出,剥出蜡块。
(5)切片将修好的蜡块进行切片,厚度为6 m。
切好的切片在38 ℃水浴锅中展片后用黏片剂处理的载玻片捞起。
4. 研究创新点
量子点材料是一种先进的纳米材料,广泛应用于生物医学、药物筛选和环境检测等研究领域。
本课题的创新之处在于针对量子点对雄性生物的生殖毒性问题,结合生物医学,运用HE染色方法以及免疫组织化学检测手段,研究碲化镉对雄性小鼠的生殖机能影响的可能机制。
5. 研究计划与进展
本研究从2014年07月开始至2015年06月结束。
1) 2014年07月至 2014年09月饲养小鼠注射碲化镉,处死小鼠,摘其睾丸,处理包埋2) 2014年09月至 2015年04月练习掌握切片,摊片,HE染色以及免疫组化染色等技术;3) 2015年05月至 2015年06月实验结果处理分析、毕业论文的撰写及答辩
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