1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
摘要:石斛碱(dendrobine)是一种吡咯里西啶衍生物类生物碱,分子式c16h25no2,分子量263.27,其骨架属于萜类化合物中的倍半萜,由异戊二烯单位组成,具有复杂的环状体系,因此石斛碱在合成上存在一定难度。
萜类合成酶(terpenoid synthase, tps)是萜类化合物合成的关键酶。
为后续进一步功能验证及构建高效表达工程菌株奠定基础,利用生物信息学手段对其参考基因组 atcc1864进行萜类基因簇分布和构成分析,从中筛选出参考萜类合酶基因(dendc),根据同源性原则设计引物克隆md33萜类合酶,利用生物信息在线分析软件对其进行理化性质分析。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
研究内容:本课题的研究内容为:长枝木霉md33倍半萜环化酶基因的克隆及理化性质分析。
研究手段:目的基因的获取:根据试剂盒提取md33的dna和rna,并进行进行电泳,通过电泳显示的条带来分析基因的含量的完整性。
目的基因克隆:以cdna和dna为模板设计特异性引物并克隆倍半萜环化酶基因。
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