猪链球菌2型菌毛相关基因srtC2的克隆表达及免疫原性分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

意义： 猪链球菌（streptococcus suis, ss）是一种重要的人兽共患病病原。

根据表面荚膜多糖的不同，分为35个血清型（1-34型及1/2型），其中2型的检出率最高，致病性最强。

猪链球菌2型（ss2）感染能够导致人和猪的脑膜炎、心内膜炎、关节炎和败血性休克等[1,2]。

2. 研究的基本内容和问题

目标：表达并纯化出猪链球菌2型zy05719中的sortase c2蛋白，分析鉴定其免疫原性。

内容：1.分析srtc2的基因序列，设计引物。

2.对sortasec2蛋白进行克隆表达并纯化。

3. 研究的方法与方案

研究方法：原核表达、蛋白纯化及western-blot。

技术路线：选定拟表达序列设计引物表达蛋白纯化蛋白测定蛋白浓度western-blot鉴定免疫原性。

实验方案：1.登录ncbi下载猪链球菌2型zy05719的完整序列。

4. 研究创新点

1.目前，国内外虽然有猪链球菌2型sortase蛋白的相关研究，但重点在sortase a蛋白，对菌毛相关蛋白sortase c的研究报道较少。

2.通过western-blot对表达纯化出的猪链球菌菌毛相关sortasec蛋白进行克隆表达对于后续蛋白互作及对致病机理的研究是重要的基础。

免疫原性的分析，也为研发猪链球菌的亚单位疫苗奠定基础。

5. 研究计划与进展

研究计划：1.一个月：查阅有关c类分选酶的文献，自行设计引物并合成。

学习并熟悉相关实验方法，准备好实验中所需的器材和试剂。

2.20天：表达sortase c蛋白。