耐利奈唑胺葡萄球菌的分离鉴定及耐药性检测开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

葡萄球菌(staphylococcus)属革兰阳性球属，种类繁多，在自然界中分布很广，是一种呈球状的细菌，在光镜下可观察到呈葡萄串状排列；无鞭毛、芽孢，是一种兼性厌氧的球菌[1]。

葡萄球菌不仅可以感染多种动物而且可以感染人，对动物和人类都有一定的致病性。

其可引起溃烂性感染、食物中毒、疳病、肺炎、馈烂性关节炎、骨髓炎、心内膜炎及脓毒血症[2]。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标：分析耐利奈唑胺葡萄球菌的耐药现状。

研究内容：本实验从江苏集约化猪场进行采样，健康猪采鼻拭子，对病猪进行剖检取组织样。

通过划线接种，革兰染色， pc鉴定等分离出葡萄球菌，然后通过pcr和加药平板筛选出耐利奈唑胺菌株，同时进行药敏试验，测出不同抗菌药物对各菌株的最小抑菌浓度（mic）,分析细菌的耐药现状。

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法：本实验所采的菌株来自于江苏省、的集约化猪场。

主要的步骤包括：1.样品采集1.1健康猪主要采集鼻拭子，每头猪尽量在鼻腔深部不同位置采集三次，采样时要用无菌的pbs浸湿棉签。

1.2对病猪，最急性和急性病例可无菌采集死亡猪的心、肝、肺、肾、脾脏、脑、淋巴结等组织，剖开后用无菌手术刀切下一部分脏器，用消毒过的镊子放入无菌的10 ml ep管中。

4. 研究创新点

由于各地区葡萄球菌流行情况，用药情况，耐药情况各不相同，因此在为猪场提供参考用药时，不能仅依赖文献进行选择。

本实验从当地猪场进行采样，临床分离出菌株，并针对耐利奈唑胺菌株进行药敏实验，选择合适的药物，为葡萄球菌病的防治用药提供参考。

5. 研究计划与进展

2017.10.22第一次采样2017.10.23-2017.10.27样品的扩增以及第一次平板纯化2017.10.27-2017.11.3 第一次纯化菌株PCR2017.11.3-2017.11.7分离菌株的保存以及第二次的纯化培养2017.11.10-2016.11.20MIC测定2017.11.25第二次采样2017.11.26-2017.11.30样品扩增，平板纯化2017.12.1-2017.12.30 分离鉴定2017.12.18第三次采样2017.12.18-2017.12.28分离纯化因为样品较多，且采样不止一次，采样后进行的鉴定项目可以同时交叉进行。