猪繁殖和呼吸综合征的检测开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

猪繁殖与呼吸综合征是由病毒引起的猪的一种繁殖障碍和呼吸系统的传染病。

该病近几年给我国养猪业带来了巨大的经济损失。

本研究主要是对进口种公猪和国内猪场送检样品进行实验室检测，以判断是否被prrsv感染，从而可以进一步确诊该病，对后期治疗以及相关预防具有重要意义。

2. 研究的基本内容和问题

1.1研究目标 熟悉送检样品从进到出的一系列编号处理检疫方法及流程；掌握对于进口该病非免疫地区种猪的猪繁殖与呼吸综合征的间接elisa检测方法；掌握对于国内猪场送检的经免疫的样品的rt-pcr的检测方法。

1.2研究内容对进口种猪送检血样使用试剂盒进行间接elisa检测，检测后分析数据得出结论，给出检测报告；对国内免疫地区的送检血样进行荧光rt-pcr的检测，检测后利用软件分析结果得出检测报告。

1.3拟解决的关键问题 1.3.1经免疫过的猪群可能在一段时间内使用间接elisa的样品可能出现假阳性的情况，可以将检测为阳性的样品进行再次进行rt-pcr检测以确诊。

3. 研究的方法与方案

2.1研究方法2.1.1送检的未经过免疫地区的样品如进口种猪样品进行间接ELISA检测2.1.2经过免疫地区的样品如已发病的送检样品按照客户需求做RT-PCR进行确诊2.2技术路线2.2.1确定送检样品的来源以及养殖规模；2.2.2根据实际需要进行适合的实验室检测；2.2.3对检测结果运用软件进行分析，得出检测报告2.3实验方案2.3.1了解送检样品的简单情况，如来源、养殖场规模、免疫情况等；2.3.2将送检血液进行编号处理，分离血清，血浆留存备用；2.3.3将需要进行间接ELISA的样品取血清利用IDEXX PRSSV*3 抗体检测试剂盒进行检测，检测后将抗原包被板放入VARIOSKAN FLASH机中，利用配套软件SkanIt RE for Varioskan FLash进行读数，将读数结果保存之后用EXCEL软件分析，得出检测报告；2.3.4将需要进行RT-PCR检测的血样取血浆进行抽提RNA,进行RT-PCR后用配套软件得出结果，根据结果做出检测报告。

2.3可行性分析 实验室设备非常完备，春季是该病的高发期，送检病料源源不断，所在单位的指导老师在该病的研究方面具有深厚基础，所以该实验方案可行。

4. 研究创新点

间接ELISA是检测猪是被PRRSV感染的常规方法，该方法敏感性高，检测快速，利用猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒配合先进的光谱扫描多功能读数仪可以非常高效的完成整个检测，送检样品24h内可以得出检测报告。

RT-PCR方法特异性好，敏感度高，准确度有保障，快速简便，配合配套软件结果直观，适合于大批量的样品检测。

5. 研究计划与进展

2015年3月2日至3月10日 查阅文献资料，了解猪繁殖与呼吸综合征病毒的国内外研究进展，检测方法；了解猪繁殖与呼吸综合征在我国的发病情况、发病特点、临床症状；了解猪繁殖与呼吸综合征给养殖业生产带来的损失和影响。

2015年3月11日至3月29日熟悉检验检疫流程、实验室情况；掌握实验室常规仪器、常规软件的使用，常用试剂的配制；初步掌握猪繁殖与呼吸综合征的检测方法。

2015年3月30日至5月20日将送检样品进行间接elisa或rt-pcr检测，得出数据并分析。