1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
白血病为一类造血干细胞恶性克隆性疾病,细胞由于增殖失控、分化障碍等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积,并浸润其他组织器官,使正常造血受抑制。
现其发病率在各种肿瘤中占第六位,严重危害人类健康,而k562细胞即为人白血病细胞。
将k562细胞在体外扩增,皮下注射入小鼠体内,制作荷瘤小鼠,采用病理学和免疫组织化学染色等鉴定方法,研究肿瘤生长情况,可为白血病相关研究提供依据。
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2. 研究的基本内容和问题
研究目标学习并掌握细胞体外扩增技术,皮下注射接种肿瘤细胞及相关鉴定方法。
研究内容 建立相关细胞扩增培养体系,完成k562细胞在体外扩增,观察细胞生长情况。
选择对数期生长细胞,以3种不同的浓度进行皮下注射接种nsg小鼠,研究肿瘤生长情况,采用病理学和免疫组织化学染色等鉴定方法,并绘制肿瘤生长曲线、测量肿瘤大小等,完成肿瘤相关鉴定。
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3. 研究的方法与方案
1细胞体外扩增 1.1细胞培养 (1)将冻存管从液氮中取出后,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。
等液体融化,拿出喷洒酒精,随后放入超净工作台。
(2)将上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中,1000转离心5分钟。
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4. 研究创新点
尚无对K562细胞接种在NSG小鼠上的相关研究,所以此为本实验创新之处。
5. 研究计划与进展
第一阶段 确定研究课题并制定研究计划 2014年12月-2015年3月 第二阶段 收集资料和研究参考文献 2015年3月2日-2015年4月1日第三阶段 进行整体试验分析实验结果 2014年4月1日-2015年5月1日 第四阶段 撰写论文及修改 2015年5月1日-2015年5月15日
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