犬巴贝斯虫TRAP基因序列分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

犬巴贝斯虫病是一种血源性原虫病。

目前，该病在国内广泛分布，有蜱滋生的地方，春、夏、秋季均可发病，近年有流行和暴发的趋势〔1〕，是宠物犬、警犬及其他工作犬等一种十分重要的寄生虫病。

犬巴贝斯虫病是由隶属于巴贝斯属（babesia）的犬巴贝斯虫（b．canis）和吉氏巴贝斯虫（b．gibsoni）引起，其中犬巴贝斯虫包含3个亚种，分别为犬巴贝斯虫亚种（b．canis canis）、韦氏巴贝斯虫亚种（b．canis vogeli）和罗氏巴贝斯虫亚种（b．canisrossi）［2］。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究目标本研究中，将对从感染犬巴贝斯虫的病犬血样中提取出巴贝斯虫的dna，然后再进一步提出trap基因并进行测序，研究分析测序结果，并评估该基因是否对犬巴贝斯虫疾病的预防、治疗有意义。

2.研究内容(1)提取犬巴贝斯虫dna。

(2)设计引物，利用pcr技术提取trap基因全长。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法和方案(1)提取血样中dna取100微升的血样加入400微升裂解液，震荡混匀，加入蛋白酶k放入冰箱中消化，之后采用苯酚氯仿的方法提取学样中的dna，-20℃保存待用。

(2)检测提取的dna中是否有巴贝斯虫的dna使用巴贝斯虫dna的引物对提取出的dna进行pcr扩增，之后跑琼脂糖凝胶电泳，根据跑出的条带分析是否提取出巴贝斯虫dna，标记筛选。

(3)优化退火温度。

4. 研究创新点

对于巴贝斯虫TRAP基因的全长进行提取并测序分析是该领域的空白，测序结果对进一步的蛋白表达或部分片段的提取有重要意义，也将为巴贝斯虫疾病的防治提供新的思路。

5. 研究计划与进展

2015.9-2015.10 查阅文献，熟悉实验操作技术，在兽医院收集患病犬血样。

2015.10-2015.12 在实验室进行实验操作，提取trap基因并进行测序。

2015.12-2016.1分析实验结果，必要时重复部分实验，撰写论文。